Doping & antidoping

Doping & antidoping

Doping, antidoping, betabloqueantes, metabolismo, absorcion y excrecion de sustancias dopantes, tecnicas instrumentales de analisis antidoping (Cromatografia, Espectrometria, inmuno-ensayos), concentracion para doping positivo, tiempos de esteroides en el cuerpo.

Doping, positive-doping, beta blockers, metabolism, absorption and excretion of doping, doping instrumental analysis techniques (Chromatography, Spectroscopy, immuno-assays) positive doping concentration, time steroids in body.

– Estructura quimica y accion farmacologica de los betabloqueantes:

El comite olimpico justifica la prohibicion de los betabloqueantes por su abuso en deportes en los que la actividad fisica no puede tener o de hecho no tiene importancia. La lista como siempre es abierta y se prohiben ademas de los nueve bloqueantes que se exponen come ejemplo, todas aquellas sustancias que ejerzan los mismos efectos.

Estos compuestos analogos al isoproterenol o derivados de este, bloquean los efectos beta de la catecolaminas y los impulsos simpaticos respectivos. Actuan sobre el corazon disminuyendo la frecuencia cardiaca, la fuerza de la contraccion y el flujo coronario, lo que explica la consecuente disminucion de la resistencia al ejercicio.

La accion bloqueante betadrenergica o bencenica, sin hidroxilos en el nucleo; existe una cadena lateral animica hidrogeno del grupo animo ha de estar sustituido por un radical isopropilo o tertulio. Las propiedades betaadrenergicas son muy intensas en las bloqueantes en cuya estructura existe un nucleo naftalenico ( nadolol, propanololo) pero decrecen si el anillo es benecenico ( acebutonolol, alprenolol, oxeprenolol)

 

– Metabolizacion de las betabloqueantes

Varios betabloqueantes apenas sufren ninguna biotransformacion e incluso algunos como el nadolol, se recupera en la orina solo en un bajo porcentaje. Otros betabloqeuantes sin embargo, experimentan un metabolismo complejo recogiendose en la orina porcentajes significativos de varios metabolicos; por ejemplo el metoprolol se demetila y se oxida y en el metabolismo del acebutol se producen una reduccion y una destilacion oxidativa con posterior oxidacion , obteniendose importantes metabolitos como el acido alfa-naftoxiclactico y el activo 4-hidroxipropanolol asi como el n-desisopronpilpropanolol  y el acido alfa-naftoxilactico en menor proporcion

 

 

– Metabolizacion de los analgesicos narcoticos:

Los alcaloides fenantrenicos poseen un metabolismo relativamente complejo. La morfina por ejemplo, sufre una n-desmetilacion para transformarse en normofina, ambas sustancias se conjugan con el acido cluconico a nivel del hidroxilo fenolito en posicion 3 y en posicion 3 y 6. la codeina experimenta una O- y una N-desmetilacion, para transformarse respectivamente en morfina y norcodeina, metabolitos que junto conla codeina libre, se conjugan en el higado con el acido cluconico.

El estudio de todos estos procesos de biotransformacion es de sumo interes para, por ejemplo, poder diferenciar que una morfina detectada pueda serlo como metabolito  de la codeina o de la heroina, o como sustancia dopante directa.

La diacetilmorfina sufre una biotransformacion  no usual entre las sustancias dopantes: una desaceitilacion en las posiciones 3 y 6 formandose 6-monoacetilmorfina y morfina, la cual a su vez se metaboliza como se ha indicado.

Los hipoanalgesicos sinteticos se metabolizan rapidamente siguiendo el proceso propio de su estructura quimica. El dextropropoxifeno, la metadona y la peptidina se desalquilan para dar norpropoxifeno, normetadona y normeperidina respectivamente ademas la metadona  se cicla a nivel de su cadena lateral, mientras que la peptidina y su metabolito se hidrolizan a los correspondientes acidos.

La pentazocina se conjuga (clucuronico) y se oxida en uno de los metilos de la cadena lateral ( pentazocicnico)

 

– Metabolismo complejo:

El metabolismo de una sustancia quimica puede producirse por diversas vias y en diversos grados antes de que los metabolitos se excreten. En el caso de las sustancias dopantes, los ejemplos son numerosos. Un clasico es el caso de la enfepramona que se metaboliza por N-desalquilacion, reduccion, desminacion y N-hidroixilacion, produciendose un altonumero de metabolitos como la N-etilaminopropiofenona.

El estudio se puede destacar la deteccion analitica de hasta diez metabolitos de la fluoximestesterona, cinco excretados libres y otros cinco conjugados.

El estudio del metabolismo de las sustancias dopantes es uno de los factores que determinan la consecucion de un buen control de dopaje ya que el conocimiento de los procesos de biotransformacion y de sus productos resultante permiten establecer a priori la metodologia mas idonea para analizar e identificar correctamente cada sustancia dopante.

doping-2-620x467-comprimido

– Procesos de absorcion de las sustancias dopantes:

Cuando se administran medicamentos, este se absorbe de inmediato, pasando al interior del organismo; tras un maximo de absorcion en un momento y un lugar determinado , la absorcion va decreciendo hasta que se produce la eliminacion del farmaco a traves de los liquidos fisiologicos, en los que se recupera.

Las vias principales de absorcion son, por una parte, indirectas (oral, sublilingual, cutanea, rectal, etc) y por otra , directas ( intramuscular, subcutanea, etc). Es interesante recordar que, segun distintas referencias bibliograficas:

. Por las vias sublingual y rectal se elude total o parcialmente el paso por el higado, ya que tanto las venas que drenan la mucosa bucal como las hemorroides media e inferior son afluentes de la vena cava, y no de la vena porta.

. Que por la via oral se produce la absorcion gastrointestinal, una de las mas importantes , que es variable en funcion del pH por ello al ser el pH muy acido en el estomago y mas alcalino en el intestino ( duodeno) los acidos y las bases debiles se absorben mejor, respectivamente , en cada una de las zonas.

. Y que por la via parenteral no se atraviesa ninguna barrera celular de tipo epitelial o endotelial.

Por otra parte , las sustancias quimicas, una vez absorbidas pasan a traves de los capilares al plasma sanguineo desde donde se distribuyen a los diversos tejidos del organismo, con distinta velocidad segun sea la irrigacion de los mismos: primero pasan a la sangre y a tejidos muy irrigados, y luego a los tejidos mas profundos. Ademas determinadas ocasiones, y en funcion de su grado de solubilidad , las sustancias no se distribuyen con uniformidad por los tejidos, sino que se acumulan selectivamente en ellos.

Todos estos factores influyen en que la vida media de un medicamento sea corta o mas larga segun se elimine rapidamente o se acumule en un tejido: se considera que un farmaco posee una vida media corta cuando se administra se distribuye y se elimina rapidamente; y una vida media larga cuando se acumula sobre todo en tejidos adiposos, retrasandose su eliminacion.

Las sustancias dopantes se administran en general formando parte de farmacos, y principalmente por las vias oral e intramuscular. Su absorcion suele variar en funcion de las caracteristicas del grupo farmacologica al que pertenecen. En particular, y segun datos bibliograficos:

. Los estimulantes ( fenilisopropilaminas, analepticos, cafeina, estricnina)  se absorben sin dificultades, generalmente por cualquier via, y casi siempre con rapidez, excepto si se utilizan preparados que impidan o retarden el proceso. Un caso particular es el de la cocaina, que no absorbe por la piel, aunque si es absorbida por mucosa y vias parentales.

-en el caso de los analgesicos narcoticos aparece cierta diversificacion. Los hipo analgesicos sinteticos se absorben por todas las vias aunque con menor actividad por via oral.

Los alcaloides fenantrenicos se absorben rapida y completamente por las vias parenterales pero , al ser bases bastante fuertes, bien ionizadas, no se absorben en el estomago-en el que solo la accion libre no ionizada liposoluble atraviesa la membrana digestiva- aunque si en el intestino donde solo estan parcialmente ionizados, produciendose en consecuencia una absorcion lenta.

. Respecto a los esteroides anabolizantes, la absorcion suele ser buena, pero lenta, por via intramuscular cuando se administran soluciones oleosas ( base aceite). Los preparados de testosterona son poco activos por via oral, debido  a que despues de ser absorbidos en el intestino se inactivan ( o pierden parcialmente su efectividad)  en el higado; sin embargo , los 17-alfametilderivados ( metiltestosterona, fluoximestestosterona, oximetolona) y la mesterolona, son activos por via bucal, aunque con ello aumenta la posibilidad de que se ocasionen trastornos hepaticos. Otros, como  la metiltestosterona, ademas de absorber bien por la mucosa bucal, son activos por via sublingual.

. Los betabloqueantes, con excepcion del pindolol, no se absorben bien en el intestino.

. Una de las clases de diureticos, los derivados del acido anrtanilico y de la matenilamida ( furosemida, bunetamida), que son acidos debiles, y los antagonistas de la aldosterona ( espironolactona, amilorida, tramtereno), se absorben igualmente bien por todas las vias, incluyendo la correspondiente al aparato gastrointestinal.

doping-3-620x467-comprimido

– Procesos de excrecion de las sustancias dopantes:

Se considera como excrecion el paso de las sustancias quimicas desde el organismo al exterior. Aunque existen diversos organos excretores, la excrecion renal esel proceso mas importante de eliminacion de dichas sustancias. Su mecanismo se basa en la filtracion de las sustancias de bajo peso molecular procedentes del plasma sanguineo, a la vez que por los tubulos renales se producen los procesos de transporte pasivo o activo, de reabsorcion o secrecion. Por estos tubulos renales se reabsorben los acidos y bases en su fraccion no ionizada, liposulible, en funcion del pH de la orina: los acidos debiles se eliminaran, en pequeña cantidad, en la orina acida, mientras que en la alcalina, cuya fraccion ionizada es mayor no se reabsorberan y se eliminaran de inmediato. En el caso de las bases debiles estos conceptos se invierten, siendo la excrecion renal mucho mayor en una orina acida que en una alcalina.

El grado y el modo de excrecion de muchas sustancias se modifican por diversas causas: por determinados estados fisiologicos; a causa de algunas sustancias, como la probenecida; debido a los diureticos; y por alteraciones del valor pH urinario.

Un ejemplo de estas influencias en la analitica del control del dopaje es el hecho de que la eliminacion por la orina de sustancias con estructura feniteelaminica puede ser muy baja siel pH urinario es superior a 7. efectivamente, en una orina ligeramente acida ( pH entre 5.4 y 7.7) de un 3 a un 40% de una dosis normal de metanfetamina se excreta, sin metabolizarse, en el transcurso de las 30 horas siguientes a su ingestion, e incluso si la orina se mas acida ( pH entre 7.8 y 8.2) el porcentaje de excrecion disminuye a cifras inferiores al 10%. Por consiguientes, del valor del pH sep ueden deducir diversas conclusiones interesantes desde el punto de vista analitica, sobre todo en lo concerniente a la posible excrecion total de algunas  sustancias. La importancia de este dato aumenta cuando es necesario discernir la posibilidad de un resultado en funcion de la concentracion de la sustancia dopante que se ha identificado en la orina.

A este respecto, se debe resaltar que, cuando mas acido sea el pH de la orina, sera  mayor la excrecion de drogas basicas; y que cuanto mas basico sea, mas facilmente se excretaran las acidas.

La biotransformacion convierte a las sustancias que la sufren en otras mas polares, menos liposullibles, por lo que disminuyen su reabsorcion en los tubulos renales y consecuentemente se facilita su excrecion, ya que, casi sistematicamente, cuanto menor es la liposubilidad de una sustancia.

Mayor es el porcentaje de su excrecion, depende de la concentracion del plasma sanguineo  y del metabolismo de se excrecion renal.. y que ademas, al absorberse el agua en mayor proporcion que las demas sustancias, estas se concentran en la orina, obteniendose un nivel superior  al existente en la sangre ; este ultimo es uno de los factores por los que la analitica del control del dopaje se realiza sobre muestras fisiologicas de orina y no de sangre.

Por ultimo, hay que señalar que mientras que unas sustancias sufren los procesos de eliminacion simplemente por excrecion, otras experimentan una biotransformacion previa a dicha excrecion; ambos procesos pueden realizarse simultaneamente o sucesivamente:

En el control analitica del dopaje tambien interesan los aspectos cuantitativos de estos procesos farmacocineticos, y en especial los que relacionan la concentracion de las sustancias en el organismo ( que por otra parte depende de la dosis administrada) y el tiempo que dura su accion.

Un parametro de evidente interes que puede proporcionar datos informativos sobre el proceso de eliminacion, metabolismo y excrecion de cada sustancia es su vida media, que quimicamente se puede definir como el tiempo necesario para que la concentracion inicial de una sustancia se reduzca, en una reaccion quimica, a la mitad y que biologicamente se define como el tiempo necesario para que la mitad de la misma se elimina en un organismo. En general, en periodos cortos, mientras que si la vida media larga, se acumula, sobre todo en el tejido adiposo.

 

Tal como se ha expuesto anteriormente, la principal via excretoria de casi todas las sustancias dopantes es la orina, medio en el que se encuentra en forma libre, conjugada metabolizada o en todas ellas. Pero hay que tener en cuenta la vida media de cada farmacologico de sustancias, o mejor, de cada una de ellas.

 

Asi, por ejemplo, las diferencias entre la vida media de los estimulantes ( generalmente corta) y la delos esteroides anabolizantes ( prolongada en general) condiciona la posibilidad de deteccion de algunas sustancias, bien porque se eliminen  rapidamente y desaparezca enseguida del organismo o porque esta eliminacion se dilate en el tiempo, pudiendo llegar a conseguirse en este caso su desaparicion en el momento de una competicion. Estas circunstancias han propiciando, por una parte que la toma de muestras se efectue en el menor plazo posible tras la competicion y, por otra, que se esten incrementando los controles fuera de competicion.

oping-4-620x467-comprimido

 

– Tecnicas instrumentales de analisis antidoping:

Las primeras sustancias dopantes que se identificaron como tales, en los ultimos años dela decada de los años setenta, fueron las aminas estimulantes. En su analisis, realizado en los laboratorios pioneros del control del dopaje, se utilizaba la cromatografia en capa fina y la cromatografia en fase gaseosa, tecnica esta ultima innovadora y revolucionaria en aquella epoca. Ademas ya se empezaba a recomendar como metodo complementario de confirmacion el analisis cromatologico tras la la formacion de derivados a el empleo de la tecnica de espectrometria de masas. Y tambien se comenzaba a ensayar diferentes aspectos que incrementaban las posibilidades de la cromatografia de gases, como los estudios de las mejoras que proporcionaban las columnas capilares, sustitutas de las empaquetadas , usualmente empleadas entonces.

Con el paso del tiempo, el perfeccionamiento de las tecnicas instrumentales, junto con el incremento del numero de sustancias dopantes con estructuras quimicas muy diversificadas, ha instaurado la cromatografia liquida de alta eficacia o presion como complemento de la cromatolopgia  de gases, posesionandose al maximo la espectrometria de masas. Las tecnicas inmunologicas, como el radoinmunoensayo, o el enzimoinmunoensayo, pueden aplicarse a determinados aspectos pre-analiticos del control del dopaje.

– Cromatografia de gases:

La cromatografia una de las tecnicas analiticas mejor conocidas y mas divulgadas es un metodo fisico de separacion que se caracteriza porque los componentes de una mezcla se distribuyen entre dos fases no miscibles: una gran areas y un fluido denominado fase movil, que se infiltra por la estacionaria; siendo la velocidad de migracion de cada sustancia por separar funcion de la distribucion de equilibrios en ambas fases.

La cromatografia de gases es una tecnica cromatologica de columna en la que el fluido constituye la fase movil es un gas que circula a traves de la fase estacionaria, la cual puede ser un solido (cromatografia, gas-solido o de absorcion), o un liquido sobre un solido que actua de soporte ( cromatografia, gas-liquido de absorcion). La fase movil, gaseosa, esta constituida por un gas inerte, denominado portador, que arrastre los componentes vaporizados de la mezcla que se va a analizar, la fase estacionaria se dispone de una columna, como relleno, o depositada sobre su pared interna.

En la cromatografia de gases se opera segun el tiempo; es decir, los componentes de la mezcla, una vez diferenciados en funcion del tiempo durante su paso a traves de la fase estacionaria, emergen de la columna segun dicho factor.

Segun la relacion entre el gas portador y la mezcla o sus componentes, la separacion puede ser diversa, siendo la realizada por elusion la mas corriente.

Esta forma de separacion consiste en introducir en la corriente de gas portador que circula por una columna, la mezcla vaporizada que se intenta resolver, a continuacion y dependiendo del poder de atraccion que ejerce la fase estacionaria sobre cada uno de los componentes de la mezcla, se producen, a distintas velocidades, emergen tambien a distintos tiempos.

El analisis directo de estos componentes, resueltos por la columna , se realiza mediante un detector apropiado que proporcione una respuesta para cada componente.

El analisis por cromatografia de gases se realiza mediante el denominado cromatografo de gases. El cromatografo, la columna que se encuentra en un recinto termostatado ( horno) con temperatura constante, pero controlable, en toda la columna, para poder mantener un valor lineal o programar en el tiempo rampas de temperatura.

Las columnas pueden ser de muy diversas caracter isitas: de vidrio, de silice, o metalicas, empaquetadas o capilares; de longitud variable ( entre 2 y 50 metros), rellenas de diferentes fases, etc.

La cromatografia de gases fue, junto con la cromatografia en capa fina, la primera tecnica utilizada en el analisis de las sustancias inicialmente prohibidas en el deporte. En la decada del sesenta algunos de los actuales laboratorios de control antidoping ya analizaban muestras fisiologicas de deportistas que habian participado en competiciones y detectaban algunos estimulantes, principalmente anfetaminas y efedrinas.

Los cromatografos utilizados en esa primera epoca de control, aunque con el mismo concepto de los actuales, diferian sustancialmente en el tipo de columnas ( de empaquetadas se paso a capilares), en la fomra de inyeccion ( se inyectaba manualmente o se realiza automaticamente), en el tipo de detector ( de utilizar detectores universales de ionizacion de llama FID a emplear detectores especificos de nitrogeno N-FID Y en los registros graficos y sistemas de tratamiento de datos.

– Cromatografia de liquidos:

Cuando en una tecnica cromatologica, la fase movil es un liquido, la cromatografia se llama de liquidos. Esta cromatografia es complementaria a la de gases, pues por ejemplo mientras esta se utiliza en el analisis de muestras volatiles de pesos moleculares inferiores a 300, la de liquidos no presenta en principio, limitaciones para sustancias de alto peso molecular.

La constitucion de un cromografo de liquidos aunque similar en esencia a la de uno de los gases ( fase movil, inyector , columna detector, registrador, integrador) difiere en algunos aspectos, principalmente en los siguientes:

– A fase movil es disolvente, un liquido generalmente organico o mezcla de varios, cuya polaridad influye en el tiempo de retencion de cada componente y en resolucion cromatografica, es decir, es responsable de la separacion conseguida.

En cada caso debe escogerse la fase movil que sea la mas selectiva dentro de unos razonables tiempos de analisis. La eleccion esta directamente condicionada por la naturaleza de la fase estacionaria: si esta es muy polar, las fases moviles deben ser aploares ( fase normal) por el contrario, una fase estacionaria apolar requiere fases moviles polares ( fase inversa o  reversa)

A finales de la decada del setenta la necesidad de identificar algunas sustancias dopantes que progresivamente se incorporaban las listas, obligo a utilizar la cromatografia de liquides en la analitica del control antidoping. La pemolina fue la primera sustancia que se identificaba por esta tecnica, la cual luego se utilizo para el analisis de corticoides y diureticos, asi como otras sustancias prohibidas como algunos antiinflamatorios.

En el caso de los cromatografos de liquidos, las diferencias entre los primeros y los actuales estriban esencialmente en el detector

( UV-VIS se ha pasado al ARRAY de iodos y de fluorescencia)

en la mayor precision  de las bombas en la disminucion del tamaño de las columnas       ( mejorando consecuentemente la selectividad y la sensibilidad) y en el tratamiento de datos.

 

doping-5-620x467-comprimido

– Espectrometria de masas:

La espectrometria de masa es una tecnica de analisis estructural basada en la separacion y medida de las masas de los iones  de un compuesto, generalmente organico. Ofrece informacion sobre la masa molecular de cada sustancia estudiada, cuyos iones, tras ser obtenidos al fragmentarse la molecula , se separan segun la relacion entre su carga y su masa.

Obteniendose unas señales que, una vez registradas en forma tabular o como diagrama de barras, constituyen el espectro de masas. Ester, especifico para cada sustancia, proporciona informacion sobre estructura, representandose graficamente la abundancia relativa de sus iones en funcion de sus respectivas masas.

La obtencion de un espectro de masa se basa en el bombardeo, con electrones de baja energia, del vapor de la muestra que se ha de analizar , una camara a baja presion ( alto vacio).

Como consecuencia de ello, se ionizan positivamente las moleculas en fase de vapor, alas cuales ademas suelen sufrir roturas, originandose fragmentos se aceleran fuera de la camara de ionizacion, entrando en un estrecho campo magnetico bajo cuya influencia se seleccionan en funcion de la relacion entre su masas y su carga

La constitucion de un espectrometro de masas difiere de la de un cromatografo, lo que no es de extrañar por la misma concepcion de la tecnica analitica.

No obstante, cabe afirmar comparativamente que se el corazon de un cromatografo es la columna, el de un espectrometro de masas es la fuente de iones, siendo el impacto electronico y la ionizacion quimica los dos tipos de fuentes mas utilizados. Pero ademas, hay otros tres grandes componentes de un espectrometro de masas: el analizador de masas, el detector y el sistema de control y tratamiento de datos.

De analizadores de masas existen varios tipos basicos, siendo los mas utilizados los cuadrupolares y los de trampa de iones.

Como detector ( y habida cuenta que el espectrometro de masas puede considerarse como tal cuando se acopla, formando un sistema a un cromatografo o a otro espectrometro de masas) actua mas generalmente un multiplicador de iones.

La espectrometria de masas, formando un sistema combinado con la cromatografia de gases, comenzo a aplicarse en la analitica del control antidoping a finales de la decada del setenta, fecha a partir dela cual se ha ido imponiendo inexorablemente como esencial en esta aplicacion cientifica. Se ha convertido en la unica tecnica posible para analizar de una manera conjunta todos los anabolicos esteroides.

Ademas, cualquier sustancia identificada por cromatografia de gases o de liquidos debe confirmarse por espectrometria de masas, en incluso hoy dia esta es la tecnica de eleccion para analizar betabloqueantes sustancias nitrogenadas que se excretan conjugadas y diureticos.

Durante los años transcurridos desde su comienzo, la evolucion de dichos sistemas ha sido espectacular, escogiendo los mismos avances que la cromatografia de gases, sobre todo en lo que se refiere al tratamiento de datos.

La incorporacion del sistema combinado de cromatografia  de liquidos y espectrometria de masa abre nuevas perspectivas en la analitica del control antidoping.

Asimismo, la combinacion espectrometria de masa espectrometria de masas puede ofrecer alternativas mas amplias, sobre todo para el analisis de sustancias complejas como las hormonas peptidicas.

 

doping-6-620x467-comprimido

Tiempo de deteccion de los esteroides:

– Nandrolona decanoato: 18 meses,

– Nandrolona penilpropionato: 12 meses,

– Boldenona: 8 meses,

– Enantato de metenolona, trembolona acetato, metandienona inyectable : 5 meses,

– Testosterona mix ( sustanon), testosterona enantato, testosterona cipionato: 3 meses,

– Oximetolona, fluoximesterona, estanozolol inyectable, formebolona, drostanolona propionato: 2meses

– Metandienona, mesterolona, etilestrenol, noretandrolona: 5 semanas,

– Oxandrolona, estanozolol oral: 3 semanas,

– Testosterona propionato: 2 semanas,

– Testosterona undecanoato: 1 semana,

– Clenbuterol  (o llamado clembuterol): 4 dias,

 

– Protocolos de control y sustancias que detectan selectivamente:

a) Cromatografia de gases: se usa principalmente para deteccion de estimulantes solamente.

b) Cromatografia de liquidos: para deteccion de diureticos, estimulantes, corticoides, antiinflamatorios esteroideos o esteroides.

c) Espectrometria de masas : Para deteccion de Anabolico esteroides, diureticos, betabloqueantes.

d) Enzimo-inmuno-ensayo y radio-inmuno-ensayo : se utilizan como protocolo de control de cualquier sustancia bajo condiciones especiales.

 

– Niveles de concentracion criticos para determinacion de doping positivo de sustancias de uso aceptado:

. Cafeina: 12 microgramos / mililitro,

. Carbossi-thc: 15 microgramos / mililitro,

. Catina: 5 microgramos / mililitro,

. Efedrina: 10 microgramos / mililitro,

. Apitestosterona: 200 microgramos / mililitro,

. Metilefedrina: 10 microgramos / mililitro,

. Morfina: 1 microgramos / mililitro,

. 19-norandrosterone: 2 nanogramos / mililitro hombres y 5 manogramos/  mililitro para mujeres,

. Fenilpropanolamina: 25 microgramos / mililitro,

. Pseudoefedrina: 25 microgramos / mililitro,

. Salbutamol: 100 manogramos/ militro como estimulante, 1000 manogramos/mililitro como anabolizante.

. Relacion testosterona epitestosterona: 6